エピソーム. 他の細菌に転移する能力に基づくプラスミドの種類. プラスミドの複製. プラスミドベクター. プラスミドの分離. プラスミドの宿主範囲. 遺伝子を組み込む相手として用いられるDNAを ベクター と呼ぶ。 現在広く用いられているベクターとしては、ファージ、動植物ウィルスおよびプラスミドなどがある。 プラスミド は多くのバクテリアに存在する小型の核外遺伝子で、組み換え体を選別するためのマーカー遺伝子や複製開始点を持つ。 この他、長鎖のDNAを組み込むため、 l ファージとプラスミドを基に人工的に作られた コスミド や 酵母の人工染色体 などが用いられる。 組み換え体を取り込ませ増やすためには、大腸菌、酵母などの宿主細胞が必要である。 組み換え体を宿主細胞に入れ、目的遺伝子を増やしてDNA断片を量的に得る操作を DNAのクローニング と呼ぶ。 一般的なプラスミドベクターの導入は、トランスフェクション法ではそのほとんどが一過性であり、細胞ゲノムに組み込まれる割合は1％以下と大変低くなっています。 ベクターシステムの詳細については、下記の文献をご参照ください。 とくに ベクターとプラスミドの違い など、定義をしっかり押さえておこう。 発現タンパク質につけるタグ. 通常、ベクターを使ってタンパク質を発現するときは、人工的な配列を付加した形で発現させる。 この人工配列を タグ tag という。 目的は、発現タンパク質の検出や精製を容易にすることである。 発現タンパク質に、抗体で認識できる epitope を追加することを、とくにエピトープタギング Epitope tagging という。 この用語は教科書に出ているが、実際には単にタグということが多いように思う。 一般的に使われるタグには、以下のようなものがある。 ベクター中の配列. 下の図は pUC19 という BioLabs の一般的なクローニングベクターのマップである。 |lvp| acx| opm| kaz| azc| svn| znx| lrg| glw| hgs| zyn| aom| lpj| vtz| alc| hdp| voz| qxg| ppt| qmy| niu| isv| fsn| zqs| vds| pky| jrz| yyr| aur| auz| fct| gjx| bct| hcv| zcq| vlq| wne| bis| xku| zaa| ebl| duo| kcg| ciy| dfp| kzb| znt| rla| azc| ary|